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旋光光谱经常被用来做手性化合物的定性或定量剖析，它的作用在多肽或含氨基酸的化合物剖析中尤为主要。最近我们遇到一个含有简单氨基酸的样品，它的测试判断标准之一就是它的比旋光度。然而，围绕着它的比旋光度，我们的测定效果与客户获得的数据有较大的差别，因而对该化合物的质量爆发了歧见。对此我们做了一个较为周全的调研，发明主要的差别竟是来自常用的高标准的化学试剂。
凭证文献我们关于这个化合物的比旋光度测定接纳氯仿溶剂制备样品，很自然地我们用了剖析纯 (AR)级别。然而当我们的数据与客户的数据显示了很大的差别时，我们使用了更高级别的色谱（HPLC）级试剂重新配样测定，效果发明该化合物的比旋光度比原先的数据增大了许多�Ｋ剂康铰确驴赡鼙还庹昭趸⒙然猓℉Cl）,进而对化合物有影响，我们测了氯仿试剂的pH值，没有发明问题。最终，我们查了氯仿的COA发明，AR级的氯仿试剂中含有一定含量的乙醇（国产标准0.3%-1%)，用来包管氯仿的稳固性，而在国产HPLC级别的氯仿试剂中乙醇的含量没有标明，因此我们以为是0%。一样平常的想法会以为这么一点乙醇含量不会比照旋光度的测定有很大的影响，然而，我们的实验效果却展示了一个同样的化合物在AR溶剂和HPLC溶剂中获得的比旋光度有6%以上的误差。为此，我们往AR级的氯仿试剂中添加了差别含量的乙醇，然后对该化合物做了一系列比旋光度测试，发明乙醇在氯仿中的含量对该化合物的比旋光度有很大的影响，见图1。
一个同样的化合物在AR溶剂和HPLC溶剂中划分获得116.64 和124.36的比旋光度。这批注晰在HPLC级氯仿试剂中，基本上确定了其中乙醇含量是或者靠近于0%，我们所使用的AR级试剂中含有约0.75%的乙醇。差别的公司可能会凭证自己的标准操作规程接纳特定级别的试剂来设置测试样品，这在企业之间交流时，一定要澄清核实。
表1 比旋光度与溶剂中乙醇占比关系趋势
（不包括AR级试剂氯仿中自己的乙醇含量）
图1 比旋光度与溶剂中乙醇占比关系趋势
（不包括AR级试剂氯仿中自己的乙醇含量）
在这次调研历程中，我们还发明溶液中肉眼看不见的浮游小颗粒对旋光度测试的稳固性有很大的影响。用了0.22um的有机过滤膜对样品溶液过滤后，样品检测效果在仪器给出的测试数据的（小数点后3位）有用数内完全一致，体现出了极高的重复性。
表2 HPLC级与AR级氯仿溶剂测试比旋光度效果差别
表3 样品溶液过滤与不过滤导致的比旋光度效果差别（相同溶剂）
图2 样品溶液过滤与不过滤导致的比旋光度差别（相同溶剂）
这次问题的爆发和调研让我们更深刻地体会到，制订测试条件非但要接纳高标准的试剂和化学药品，并且对所使用的质料物品包括试剂要有详实充分的认知并在操作规程中注明，以确保在合理的测试条件下获得具有高度重复性和准确性的最佳测试效果。
注：本文中所使用的旋光光度仪是: 美国鲁道夫研究剖析公司（Rudolph Research Analytical）的一款自动旋光仪 AUTOPOL I ，温度控制20°C。
